| 产品编号 | C-0013 |
| 英文名称 | WIP (Lysis Buffer for WB/IP Assays, Nondenaturing) |
| 中文名称 | Western及IP细胞裂解液（非变性） |
| 别 名 | Tissue and Cell Lysis Reagent; Cell lysis buffer for Western and IP; Mammalian Total Protein Extraction Kit; Protein Extraction Kit; Lysis Buffer for WB/IP Assays; WIP (Lysis Buffer for WB/IP Assays) 非变性组织/细胞裂解液; Western/IP细胞裂解液; Western/IP组织细胞裂解液; WB/IP细胞裂解液; 免疫印迹及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液; WB/IP组织细胞裂解液; Western及IP细胞裂解液 |
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Specific References (3) | C-0013 has been referenced in 3 publications.
[IF=3.38] Wei F et al. Diagnostic significance of methylation of PTEN and DAPK in thyroid tumors. Clin Endocrinol (Oxf)
. 2020 Aug;93(2):187-195. WB ; human.
[IF=2.65] Zong Chunxiao. et al. Huayu Sanjie Enema Liquid Relieves Pain in Endometriosis Model Rats by Inhibiting Inflammation, Peripheral Sensitization, and Pelvic Adhesion. EVID-BASED COMPL ALT. 2022;2022:5256578
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| 保存条件 | Store at -20℃ stable for 12 months. |
| 注意事项 | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
| 产品介绍 |
Tissue and Cell Lysis Reagent for Western Blot and Immunoprecipitation. A proprietary, non-denaturing formulation of zwitterionic detergents used for the lysis of bacterial cells and extraction of recombinant proteins. 一. Western及IP细胞裂解液使用说明书 产品简介 WIP组织细胞裂解液(Tissue and Cell lysis solution for Western Blot and Immunoprecipitation )，是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本产品裂解细胞获得的裂解产物，可用于PAGE，蛋白印迹（Western Blot），免疫沉淀(immnolprecipitation，IP)，免疫共沉淀(co-IP) 和蛋白与多肽的分离纯化。 WIP裂解液的主要成分为Tris(pH 7.5，20mM)，150mM NaCl，去垢剂Triton X-100以及多种蛋白酶抑制剂,无需自备PMSF、磷酸酶抑制剂等蛋白酶抑制剂。WIP不仅可以用于细胞培养物的裂解，也可直接用于大多数动物组织的裂解。在有效地裂解组织和细胞的同时，可强烈地抑制蛋白、多肽的降解，并保持原有的分子结构和蛋白间相互作用。 用WIP裂解得到的组织细胞蛋白样品，可以用博奥森生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford试剂盒测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。 包装清单 WIP组织细胞裂解液 30ml PMSF（100X） 0.3ml 保存条件： -20°C保存，一年有效。 注意事项： 1．为获得最佳的实验效果，可适当分装使用，以尽量避免反复冻融。 2．PMSF应现用现加。 3．裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4°C进行。 4．蛋白酶抑制剂均有较高的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦直接接触，请立即用流水冲洗，再向医疗保健结构咨询。 二.使用方法说明 1．培养细胞 取出WIP裂解液，待融化后，颠倒混匀数次，适量分装冻存。在使用前取出，按比例加入PMSF（使其最终浓度为1mM），混匀，立即使用。 贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰，也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入WIP。用枪吹打数下，使WIP和细胞充分接触。通常WIP接触细胞数秒后细胞就会被裂解。 悬浮细胞，收集培养细胞，离心去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰，也可以不洗)，用手指把细胞用力弹散，按6孔板每孔细胞加入100-200微升的比例加入WIP。如果细胞数量较大，应按50-100万细胞/管分装或根据细胞数量按比例增加WIP。用手指轻弹管底以促进WIP和细胞充分接触，裂解完全时应无明显的细胞颗粒。 裂解物经10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。 2．组织样品 取Ep管，分别称重标记，把组织剪切成小块装入Ep管中，称重。按每20毫克组织加100-200微升的比例加入WIP(如裂解不完全，可以适当增加WIP的用量；如需要的蛋白样品浓度较高，可以适当减少WIP的用量)。用手握式电动组织细胞匀浆器匀浆约1分钟或直至充分裂解。10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 如果组织样品本身非常细小，如淋巴细胞，可直接加入WIP裂解，通过振荡（Vortex）以使样品裂解完全 |
| 1、抗体溶解方法 | |
| 2、抗体修复方式 | |
| 3、常用试剂的配制 | |
| 4、免疫组化操作步骤 | |
| 5、免疫组化问题解答 | |
| 6、Western Blotting 操作步骤 | |
| 7、Western Blotting 问题解答 | |
| 8、关于肽链的设计 | |
| 9、多肽的溶解与保存 | |
| 10、酶标抗体效价测定程序 | |
