CRISPR/Cas9基因敲除技术服务 服务编号：SV1501

一. CRISPR/Cas9技术介绍

      CRISPR/Cas9 是一种基于细菌天然免疫机制开发出的基因编辑技术，用于抵御病毒等外来物入侵的一种防御机制。经改造的CRISPR系统主要由Cas9蛋白和单链向导RNA（sgRNA）组成，其中sgRNA对靶序列进行特异性识别，Cas9蛋白负责对识别的靶序列进行切割，从而实现DNA的双链断裂。

      DNA双链断裂后，细胞对DNA的损伤修复机制就会被激活。目前主要由两种修复机制，非同源末端连接（NHEJ）修复和同源重组介导的修复（HDR）。没有外源模板时，机体主要进行NHEJ修复。NHEJ修复过程中，会在切割位点随机的进行缺失或插入碱基序列，导致DNA移码突变，从而使基因不能正常表达。存在外源模板的情况下，机体会启动HDR修复来实现基因的精准插入或者替换。

二．服务内容与流程

服务内容：

Tip: 请您填写项目申请表，以便Bioss为您提供更好的技术服务。

服务流程：

1. 客户提供需要敲除的指标信息，与公司商定具体的制备项目、数量和费用，双方签订《委托CRISPR/Cas9基因敲除服务合同》。

2. 双方确定合作细节，实验过程中及时反馈实验进程，并按照规定时间完成委托服务。并向客户提供委托产品与实验报告。

三．技术流程

1.RNP转染法

2.质粒转染法

四．案例结果展示

五．服务优势

1. 两种敲除方法（质粒法和RNP法）可供客户选择。

2. 每个靶标设计多条sgRNA，提供多种敲除策略，最大限度的提高的KO效率，提高蛋白水平的敲除概率。

3. 通过Sanger测序后，多种软件分析编辑效率，提高编辑结果的准确性。

4. 不同的细胞系具有专属的转染方案，提高靶标编辑的效率。