流式细胞分选技术服务服务编号：SV1401

一、简介/定义

细胞分选(cell sorting)是根据细胞所具有的特性将某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术。

流式细胞分选(Flow cytometry sorting)是在流式细胞术检测细胞表型的基础上，使用充电分选技术以实现多种特定表型细胞的鉴定、分类、定量和分离。具有分选参数多、群体多、纯度高、灵活性强等优势。分选后细胞可做进一步生物学研究如单细胞测序等。

活细胞的荧光激活细胞分选(FACS)根据荧光标记将细胞群分成亚群。与非分选流式分析相比，流式细胞分选涉及更复杂的机制。使用荧光偶联抗体染色的细胞可以根据它们所染色的荧光团而彼此分离。例如，表达一种细胞标记物的细胞可以使用识别该标记物的FITC偶联的抗体来标记，而表达不同标记物的另一种细胞类型可以使用对该标记物特异的PE偶联的抗体来标记。流式细胞分选可基于不同的荧光标记将不同类型的细胞分离，这就是流式细胞分选术的基本原理。

二、 设备特点

Invitrogen™ Bigfoot全光谱流式细胞分选仪配有Sasquatch软件(SQS)，可提供创新、易用、高速、安全的细胞分选，满足您所在实验室当前和未来的研究需求。具有更高的灵敏度、分辨率，更高的分选效率，配置有4个激光器，27个检测通道，可进行复杂的分选。

三、 仪器配置

四、 服务流程

1. Tip: 请您填写项目申请表，以便我们为您提供更好的技术服务。

2. 客户提交流式细胞分选检测请求与实验要求，与公司商定具体的实验项目、数量和费用，双方签订《委托流式细胞分选检测服务合同书》。

3. 客户提供检测样品，我公司按照协定要求安排检测项目预实验，双方根据预实验结果商定实验技术参数细节。

4. 公司实验室正式开展检测实验，在规定时间内向客户提交实验数据和检测报告。

五、 送样要求

1. 样品浓度：细胞需无菌，细胞浓度不少于1-10×106 cells/ml。

2. 样品体积：1-2ml/管，至少需要500μl/管。

3. 注意：

（1） 保证样本的无菌状态，因为分选得到的细胞还要继续培养；

（2） 不能使用固定剂固定细胞，因为活细胞经固定剂处理后即死亡；

（3） 保证上机样品为单细胞悬液；

（4） 准备充足的细胞；

（5） 建议分选上样管中的缓冲液使用含2% FBS的PBS，普通培养基中的酚红可能会干扰分选；若用培养基的话，颜色不能太深，血清浓度不能超过2%，否则粘性太大影响分选。

（6） 如要分选GFP等转染的样品，请提供未经转染的相同细胞为阴性对照；

（7） 如要做多重荧光染色标本的分选，请务必准备未经染色（或染有Isotype）及单染（单阳）样品，以便做检测前补偿校正用。

（8） 如要去除死细胞，在不影响后续实验前提下，可以加入7-AAD或是PI。

（9） 由于在分选过程中，样本可能通过液滴震荡产生气溶胶，所以不接受含有会传播人类病原微生物的生物有害样本，也不接受含放射性生物样品。

（10） 需告知细胞的大小与形态，以便选择合适的喷嘴。所分选细胞的直径最好小于喷嘴直径的1/5，至少小于1/3。本机常规装载100μm喷嘴，如有特殊需要，请提前与bioss（博奥森）技术人员沟通。

（11） 低含量细胞（占1%以下）的分选会导致低纯度及低回收率。因此，我们建议事先富集你感兴趣的细胞。

（12） 本仪器以分选为主，单纯的流式分析实验建议咨询流式分型技术服务，分选前最好先使用其它流式细胞仪确认细胞阳性染色比例。

五、服务时间

周一到周五 9:00--17:00（提前一天预约），实验结果报告一周内提供，具体周期根据实验内容而定。

六、收费标准

请联系负责人询价。

七、案例展示