一、检测服务内容
二、服务流程
客户提交流式细胞检测请求与实验要求，与公司商定具体的实验项目、数量和费用，双方签订《委托流式细胞检测服务合同书》；
客户提供检测样品，我公司按照协定要求安排检测项目预实验，双方根据预实验结果商定实验技术参数细节；
公司实验室正式开展检测实验，在规定时间内向客户提交实验数据和检测报告。
三、样品要求
客户提供信息：1.提供抗体货号及厂家 2.细胞信息 3.实验方案及具体要求
样品寄送须知：细胞常温, 生长良好，无污染，细胞数量＞106个；组织离体后制成单细胞悬液，加入PBS/培养基内4℃运输；血液采集在EDTA/肝素钠的采血管内混匀，4℃运输。
四、交付标准
上机原始数据，高清散点图直方图密度图等数据分析图片，详细检测报告。
更多详情请见官网：www.bioss.com.cn
实验数据分享
细胞抗原鉴定
实验原理：根据抗原-抗体反应原理，检测细胞表面或者胞内抗原，对于同一样品检测不同种抗原，可以分为单标、双标以及多标。实验流程：离心去上清-调整细胞密度-固定穿膜-加入标记抗体-孵育-离心去上清-重悬细胞-上机检测。实验结果展示：
单染直方图
单染散点图
双染散点图
细胞凋亡检测
实验原理：Annexin V选择性结合磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)，是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS高亲和力特异性结合。在正常细胞中， PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的PS由脂膜内侧翻向外侧。使用带有绿色荧光FITC标记的Annexin V，即Annexin V-FITC，则可通过流式细胞仪或荧光显微镜直接检测到PS外翻这一细胞凋亡的重要特征。此方法被公认为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。实验流程：细胞培养-转染或药物处理-细胞收集- Annexin V-FITC/PI标记-上机检测。实验结果展示：
左下象限LL为活细胞；右下象限LR为早期凋亡细胞；右上象限UR为晚期凋亡细胞；左上象限UL为碎片及坏死细胞。
Annexin V-FITC（绿色）染色细胞为早期凋亡细胞；PI（红色）染色细胞为坏死细胞；Annexin V-FITC/PI双染细胞为晚凋或坏死细胞
细胞周期检测
实验原理：碘化丙啶(Propidium，简称PI)是一种双链DNA 的荧光染料，PI和双链DNA 结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA 的含量成正比。细胞内的DNA 被PI染色后，可使用流式细胞仪对细胞进行DNA 含量测定，然后根据DNA 含量的分布情况进行细胞周期分析。实验流程：细胞培养-转染或药物处理-细胞收集-细胞周期试剂盒-上机检测。实验结果展示：
细胞周期拟合图
线粒体膜电位检测-JC-1
实验原理：线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。JC-1是一种理想的用于检测线粒体膜电位的荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。其原理是，当线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体基质中，形成聚合物，488nm激发时的最大发射波长为590nm，可以产生红色荧光，在流式上表现为FL1和FL2双阳性;当线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体，488nm激发时最大发射波长为527nm，可以产生绿色荧光，形成流式图汇总所有细胞FL1为阳性。凋亡细胞则大多为FL1单阳性。不同荧光颜色的转变反应线粒体膜电位的变化，常用红绿荧光的相对比例衡量线粒体去极化的比例。实验流程：细胞离心去上清-调整细胞密度-装载探针-孵育探针-上机检测。
