原因：HRP的浓度过高；

解决：稀释HRP至少10倍。

原因：HRP的浓度过高；

解决：稀释HRP至少10倍。

原因：HRP的浓度过高；

解决：稀释HRP至少10倍。

原因：HRP的浓度过高；

解决：稀释HRP至少10倍。

原因：

1.太多的HRP积聚导致信号快速的消退；

2.抗原或抗体的浓度不够；

3.转印不成功；

4.HRP或其他底物的效价降低。

解决：

1.稀释HRP至少10倍；

2.增加其浓度；

3.寻找合适的转移方法和条件；

4.选择其他的合适底物。

原因：

1.HRP浓度过高；

2.封闭无效；

3.不适合的封闭试剂；

4.洗涤不充分和洗涤液的量；

5.胶片曝光过度；

6.抗原或抗体的浓度太高。

解决：

1.稀释HRP至少10倍；

2.寻找合适的封闭方法；

3.选用其他的封闭试剂；

4.增加洗涤的时间,次数；

5.减少曝光时间；

6.稀释抗原或抗体。

原因：

1.蛋白质没有被充分转印；

2.膜没有预先浸湿；

3.在胶片和膜之间有气泡。

解决：

1.寻找合适的转移方法和条件；

2.在转印前充分浸湿；

3.在暴光之前赶走气泡。

原因：HRP标记的抗体出现了积聚；

解决：稀释HRP至少10倍。

原因：

1.HRP浓度过高；

2.SDS促使非特异蛋白质条带黏附在目的蛋白质条带上。

解决：

1.稀释HRP至少10倍；

2.在操作过程中不要加SDS。