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AO/EB双荧光染色试剂盒
AO/EB Double Fluorescence Staining Kit
产品编号:
S0012
产品规格:
25ml×2    50ml×2    250ml×2    
保存条件:
4℃避光保存,有效期1年。
产品介绍:
产品简介:
吖啶橙 (Acridine Orange) 是一种荧光色素,其检测激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA结合量少发绿色荧光,与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。溴化乙锭 (Ethidium?Bromide, EB) 仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征,二者很容易在荧光显微镜下判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:1. 活细胞(VN),核染色质着绿色均匀荧光并呈正常结构;2. 早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;3. 晚期凋亡细胞(NVA),核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状;4. 非凋亡的死亡细胞(NVN),核染色质着橘红色并呈正常结构。因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。本产品AO、EB 溶液浓度为100ug/ml,所含稳定剂不影响实验效果。

使用方法:
1. 使用前先根据用量,将AO 溶液和EB 溶液按1:1 混合成工作液,现用现配。
2. 对于贴壁细胞或爬片,去掉培养基,用PBS 洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞,加入新的PBS;如果需要观察全部细胞特性,保留未贴壁细胞,可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS 中加入20ul 工作液即可。室温放置2-5min 后于荧光显微镜下观察。
3. 对于悬浮细胞,可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS 中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS 中加入20ul 工作液即可。室温放置2-5min 后于荧光显微镜下观察。

注意事项:
1. 含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。
2. 染色液工作浓度和染色时间可根据具体实验情况适当调整,以期达到最佳效果。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服,戴手套。
4. 操作是需要避光。

Important Note: This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.